如何排查发酵罐使用过程中的染菌问题呢？

在不锈钢发酵罐从碳钢制造到不锈钢制造的变化过程中，除了一次性不锈钢发酵罐外，大多采用磁力搅拌，部分部件采用一次性仪表，通风管从上部移到侧面，一次性袋固定在容器内外，其他控制部件的形式与原来相同。除了收集和显示下位机的所有数据外，DCS系统还可以修改和控制参数对象。早期不锈钢发酵罐控制系统采用数据采集器，分别采集模拟量信号。模块中转换模数后，计算机的232接口与上位机通信。后期不锈钢发酵罐控制系统采用PLC与上位机通信，部分控制器还采用SCADA系统监控现场运行设备，实现数据采集、设备控制、测量、参数调整、各种信号报警等功能。此外，PLC和通用监控软件MCGS组态软件应用于发酵生物反应器控制系统，可实时监控现场环境参数和各执行部件的控制状态，满足不同的工艺要求，大大提高了系统的可靠性和灵活性。

在不锈钢发酵罐的使用过程中，液体菌种取代固体菌种的趋势得到了大家的认可。现在越来越多的工厂开始使用液体菌种进行生产。虽然液体菌种的生产指标优于固体菌种，但液体菌种的风险逐渐被人们忽视。在接种液体菌种之前，必须经过严格的检测才能使用，但更重要的是，一旦不锈钢发酵罐出现染菌，必须尽快分析染菌的原因并解决。要分析染菌的原因，必须从每个环节染菌的表现入手。另一方面，当染菌出现时，我们可以找出哪个环节有问题。

1、灭菌

发酵罐灭菌不引起的染菌会在2-3天内表现出来，表现为培养液逐渐浑浊，菌球形成和生长缓慢。不同的细菌在排气味道上表现出不同的程度。必须注意的是，如果培养低温品种，如金针菇，表现时间会延迟，即使在接种疫苗之前，也没有明显的宏观表现。只有通过检测，才能确定感染的细菌。不锈钢发酵罐灭菌不的主要原因是灭菌罐(不锈钢发酵罐)，单罐只要在灭菌过程中操作。

解决方法：不锈钢发酵罐，检查灭菌锅程序、管道、电磁阀（气动阀）、温度传感器、压力传感器等。检查冷空气是否排出，管道灭菌是否达标等。经调查无法解决，需适当增加灭菌时间或温度。

2、冷却

冷却过程中染菌的主要原因是冷却过程到压力0之前没有及时将不锈钢发酵罐进气，造成负压。虽然管道上安装了单向阀，但要知道单向阀不是对的，单向阀长期使用后出现故障的可能性很高。一般冷却引起的染菌概率不高，染菌的时间比灭菌不引起的染菌晚。

解决方法:不锈钢发酵罐冷却时安排专人负责，避免负压，加强不锈钢发酵罐管件的日常检查和维护。

3、接种

不锈钢发酵罐接种的过程是罐体开放与外界连接的过程，是最危险的环节。接种引起的染菌会很快出现，1-2天就有可能出现，主要是人员操作不当造成的，食用菌层流罩净化效果下降也会引起染菌。

解决方法:加强接种人员的操作技能，制定操作规程；定期检查接种层流罩的净化效果，必要时每天检查层流罩的平板沉降。

4、气源

气源引起的不锈钢发酵罐染菌时期不确定，不规则，气源带菌的严重程度也分为染菌的严重程度。特别是气源进水影响大，气源染菌的特点之一就是不同天数的不锈钢发酵罐同时表现染菌。

解决方法：每天或定期检测无菌空气质量，加强无菌空气系统设备的检测。气源长期中断也会影响液体菌种的生长，但一般不会引起染菌。

5、三角瓶菌种

三角瓶菌种不纯会直接导致不锈钢发酵罐染菌，表现时间很早，一天就会出现剧烈表现。这种情况发生的概率不是很大，但也要足够重视三角瓶菌种的纯度。一个合格的液体菌种技术人员不仅在不锈钢发酵罐中做得很好，而且在制作试管母种和三角瓶方面也很重要。

解决方法:注意和加强试管母种和三角瓶菌种的生产水平，制定标准并执行。如果不确定三角瓶菌种，接种后可以空培养三角瓶。