由于细胞壁等因素的限制，植物的单细胞研究要稍晚于动物领域，目前植物单细胞文章主要是针对少量单细胞转录组异质性的研究，高通量水平还未应用到植物领域。2019年2月4日，美国密歇根大学John Schiefelbein实验室在线发表了拟南芥高通量单细胞转录组（scRNA）研究文章，发表杂志为Plant Physiology（IF=5.949），这也是篇将10x Genomics scRNA测序应用在植物中的发表文献。

植物10x Genomics scRNA-seq一个很大的限制因素是无法获得高活力的原生质体，下面给出了上述文献中拟南芥根组织原生质体的制备流程，供参考，实际操作时需要根据研究的组织类型，对实验条件进行优化，例如解离酶的选择、解离酶的处理时间等。

1、溶液准备

清洗液：0.4 mM （Mannitol）、20mM MES (pH 5.7)、20 mM KCl、10mM CaCl2、0.1% (w/v) BSA；

酶解液：1.25% (w/v) 纤维素酶Cellulase("ONOZUKA" R-10, Yakult)、0.1% (w/v)果胶酶Pectolyase (P-3026, Sigma-Aldrich)、0.4 mM Mannitol、20mM MES (pH 5.7)、20 mM KCl、10mM CaCl2、0.1% (w/v) BSA。

2、原生质体悬液制备

1）  取拟南芥根尖，切碎，70-μm滤器过滤；

2）  置于35 mm培养皿中，加入酶解液；

3）  放入恒温摇床（85 rpm），25°C酶解1h；

4）  500 g 离心10 min；

5）  离心，加入500 μL清洗液洗涤；

6）  40μm细胞滤器过滤原生质体悬液后，200g离心 6 min；

7）  清洗液重悬，确定原生质体浓度，冰上放置，可进行10x上机标记。