在用尼康显微镜观察标本之前，必须首先对显徽镜进行一些调节和预备操作，这些调节主要包括照明器、镜筒、视场光阑和集光器的调节。
奥林巴斯显微镜

    照明器的调节。首先接通电源，打开调压变压器使工作电压在灯泡所标电压的范围之内，然后根据所用显微镜灯的类型调中。调节的方法是把一个刻有几个同心圆环的场玻璃圆盘放在视场光阑处，调节灯聚光器使灯丝的像和灯丝的反射像聚焦在场玻璃圆盘上，并且通过灯室上的灯来调节螺旋和反光镜调节螺旋，把灯丝的像和灯丝的反射像*移到圆盘的*并处于并排相对的位置，这时灯就处于均匀的照明状态。

    尼康显微镜镜筒的调节。首先把有标本的载玻片用片夹固定在载物台上，选择一个中等放大倍数的物镜用来进行聚焦。把集光器上升到zui高位置，并打开孔径光阑和视场光阑。然后用推或拉的方法调节两个目镜之间的距离。在两个目镜上同时用两只眼睛观察使得两个圆形的视场正好*重合，这时双目镜筒刻度盘上所读出的数字，就是观察者两眼瞳孔之间的距离（以毫米为单位）。这个距离对于同一个观察者来说是固定不变的，因此记下这个读数，在再次观察时可以直接从刻度盘上调节到这个距离。对于有缺陷的视力还可以通过调节目镜螺旋进行矫正，矫正的方法是:先用右眼通过左边的目镜观察标本并用细调旋钮聚焦;然后用左眼通过左边的目镜观察已聚焦的同一标本，如果观察者视力正常，用左眼所看到的物像仍然是清晰的;如果观察者视力有缺陷，这个物像就不清晰，这时应转动左边目镜上的聚焦螺旋（注意决不能转动细调旋钮）再次聚焦标本使之*清晰为止，此后在尼康显微镜的使用过程中再不能随意转动目镜聚焦螺旋。

    集光器的调中和视场光阑的调节。这种调节是根据柯勒照明原理进行的，因此一般被称为柯勒照明法。它对于尼康显微镜的使用是非常重要的，其步骤是:

（ 1）关闭视场光阑，这时在视场中可以看到一个边缘模糊的圆形或多边形亮斑   

（2）旋转集光器垂直调节旋钮，逐渐降低集光器直到圆形或多边形亮斑（实际上是视场光阑的像）的边缘*清晰。

（ 3 ）调节集光器上的两个调中螺旋，把视场光阑的像调到视场的*。

（ 4）逐渐打开视场光阑，使得视场光阑像的边缘刚好消失在视场之外。

    在这里顺便谈一下视场光阂和孔径光阂的功能及其调节的依据。

    视场光阑的作用是控制标本照明区域的大小，阻止对于像的形成所不需要的光线进入标本，从而保护标本以免过热受损。因此视场光阑的大小以开到正好使被观察的物场*照明为宜，当更换不同放大倍数的物镜时，由于物场大小发生变化，就要重新调节视场光阑，但并不需要重新调中集光器。

    孔径光阑是决定尼康显微镜成像的分辨力和反差的重要光学部件之一。孔径光阑的大小是根据所用物镜的孔径来决定的，当集光器的孔径稍低于物镜的孔径，即物镜孔径的70%被光线充满时，能够达到的光学效果。因此当更换不同数值孔径的物镜时，就要根据物镜数值孔径的70%计算值，及时地调节集光器的孔径光阑。还必须注意的是:像的亮度决不能用孔径光阑来调节，而只能用调节变压器或使用中密度滤光片来调节。