2023年01月15日 11:36:46 来源:上海双旭电子有限公司 >> 进入该公司展台 阅读量:14
传统电泳仪性能特点归纳
电泳是电解质中的带电粒子在电场作用下以不同速度向相反方向迁移的现象。利用电泳现象分离化学成分和生化成分的仪器称为电泳仪。自1930年代和1940年代以来,相继开发了多种基于抗对流载体的电泳装置。由于焦耳热的限制,传统的电泳仪只能在低电场强度下进行电泳,分离时间长,分离效率低。
传统的电泳根据有无载体可分为无载体电泳和载体电泳。无载体电泳是在液体介质中进行自由界面电泳的电泳。载体电泳是在固体介质中进行的电泳。载体的主要作用是防止电泳过程中的对流和扩散,使分离的物体能够以*高分辨率分离。有纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺缩合。凝胶电泳、SDS-PAGE电泳、琼脂糖凝胶电泳、等电聚焦电泳和等速电泳等。
1、自由界面电泳:
1、原理:根据试样各组分移动速度的不同,溶液在U型管中分离。
2、特点:无载体,对流严重,元件不能分离,元件相互重叠,检测困难。
3、应用:目前很少使用。
2.纸电泳:
1.载体:滤纸。
2、原理:由于载体孔径大,不存在分子筛效应,分离主要依靠样品各组分的质荷比差异。
3、特点:滤纸结构松散,孔径大,导致电泳慢,时间长,样品扩散严重,分辨率低。
4、应用:多用于核苷酸的分离。
3、醋酸纤维素薄膜电泳:
1、载体:醋酸纤维素薄膜。
2、原理:由于载体孔径大,不存在分子筛效应,分离主要依靠样品各组分的质荷比差异。
3、与纸电泳相比的优点:电渗效果小,化学惰性好,可以*大限度地减少对流。
4、应用:适用于蛋白质和同工酶的分离分析,特别适用于病理状态下微量异常蛋白质的检测。
四。聚丙烯酰胺凝胶电泳:
1.载体:聚丙烯酰胺凝胶。
2、原理:质荷比和分子筛效应。
3、特点:机械强度好,透明有弹性,化学性质稳定,不吸附,几乎不发生电渗,可制成不同孔径大小的凝胶,分辨率高。
4、应用:用于蛋白质和较小核酸分子的分离。
5. SDS-PAGE电泳:
1.载体:聚丙烯酰胺凝胶。
2、原理:分子筛效应。
3、特点:样品无需纯化,操作简单快捷,重复性高。
4、应用:测定蛋白质亚基相对分子量的*佳方法。
六。琼脂糖凝胶电泳:
1.载体:琼脂糖凝胶。
2、原理:分子筛效应。
3、特点:凝胶孔径大,对样品的吸附极小,分辨率高,重复性好。
4、应用:用于核酸分离。
7、等电聚焦电泳:
1、载体:聚丙烯酰胺凝胶等。
2、原理:利用蛋白质分子或其他两亲分子等电点的差异,在稳定、连续、线性的pH梯度下进行分离。
3.特点:分辨率高,清晰窄带,分辨率至少可达0.01 pH单位。
4、应用:分离对象限于蛋白质等两亲性分子,常用于同工酶的分离分析和pI的测定。
8. 等速电泳:
1、载体:聚丙烯酰胺凝胶等。
2、原理:使用迁移率大于样品中任何成分的电解质作为前导电解质,使用迁移率小于样品中任何成分的电解质作为尾随电解质。在前导电解质和尾随电解质之间,根据它们各自迁移率的差异进行分离。
3、特点:区域界面明显,富集浓缩效果。
4、应用:目前应用不多。