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解决qPCR无Ct信号出现现象

2023年01月02日 16:51:21      来源:上海抚生实业有限公司 >> 进入该公司展台      阅读量:22

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解决qPCR无Ct信号出现现象:


1、反应循环参数不够,一般要在35个循环以上,但是过多的循环次数可增加背景值。


2、检测荧光信号的步骤有误。SYBRgreen法(SG法)采用的是72延伸时采集荧光信号,taqman法则是在退火结束或延伸结束时进行信号采集。


3、引物或探针降解,可用PAGE电泳检测其完整性,若是电泳条带呈弥散状,可考虑重新合成引物或探针。


4、模板不足或降解,则可以重新提取核酸模板。

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